你了解螺旋方法嗎?螺旋方法可以自動(dòng)、標(biāo)準(zhǔn)化地接種細(xì)菌。這項(xiàng)技術(shù)使得我們能在一塊培養(yǎng)皿上完成4個(gè)梯度的稀釋。
樣品以阿基米德螺旋的形式在培養(yǎng)皿表面接種(接種體積從中心到外圍遞減)。該體積是被校準(zhǔn)過(guò)的,培養(yǎng)皿上每個(gè)點(diǎn)的容量都是可知的。
為什么選擇螺旋方法?
使用螺旋方法能夠大大提高您實(shí)驗(yàn)室的分析能力:無(wú)需手動(dòng)連續(xù)稀釋樣品,即可完成一次標(biāo)準(zhǔn)化的自動(dòng)接種。
l 在一個(gè)培養(yǎng)皿上完成100-1X107CFU/ml
l 耗材的節(jié)省可達(dá)75%
l 接種一個(gè)培養(yǎng)皿只需8s
如何計(jì)數(shù)?
螺旋方法使得我們能在培養(yǎng)皿表面接種呈對(duì)數(shù)遞減的曲線。體積是被校準(zhǔn)過(guò)的,培養(yǎng)皿上每個(gè)點(diǎn)的容量都是可知的。計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿區(qū)域內(nèi)的菌落數(shù),除以該區(qū)域的接種體積,以此可計(jì)算出細(xì)菌濃度。
手工計(jì)數(shù)時(shí),從外側(cè)開始,至少計(jì)數(shù)20個(gè)菌落,然后在對(duì)角的1/4部分重復(fù)這一操作。
計(jì)數(shù)的小菌落數(shù)(15或20)取決于參數(shù)中定義的標(biāo)準(zhǔn)。
n : 細(xì)菌濃度,以CFU/ml為單位
N : 計(jì)數(shù)出的菌落個(gè)數(shù)
D : 樣品的稀釋倍數(shù)
V : 計(jì)數(shù)的區(qū)域?qū)?yīng)的接種體積,以µL為單位(見體積對(duì)照表)
easySpiral 和easySpiral Pro
接種的培養(yǎng)皿實(shí)例
在PCA上接種蠟樣芽胞桿菌
在PCA上接種枯草芽胞桿菌
在麥康凱培養(yǎng)基上接種大腸桿菌
在MRS培養(yǎng)基上接種干酪乳桿菌
綠膿桿菌
螺旋方法,25年的經(jīng)驗(yàn)
1973年,FDA研究員埃德坎貝爾博士發(fā)明了螺旋方法來(lái)自動(dòng)計(jì)算實(shí)驗(yàn)室工作中的細(xì)菌數(shù)量。此后,他和interscience的創(chuàng)始人François Jalenques合作開發(fā)儀器,于1992年重新校正了螺旋方法并為其申請(qǐng)了。
從那時(shí)起,全自動(dòng)螺旋接種儀Spiral 就和XP V08-034, ISO 7218, ISO 4833-2, ISO 15189, FDA-BAM以及AOAC標(biāo)準(zhǔn)一同作為指導(dǎo)方法。
interscience已經(jīng)推出了第三代螺旋接種儀easySpiral 和easySpiral Pro。
interscience的螺旋方法:easySpiral產(chǎn)品系列